常规荧光检测是否可以应用于酶标仪?
加入时间:2014-06-11 11:00:43 当前新闻点击率:3780
近年来,酶标仪的检测方法正在不断改革更新,越来越多的医疗器械厂家开始采用荧光探针作为检测手段,其实这具有很多优势,越来越多的基于其原理的检测试剂盒问世。如何能更好的提高其检测的灵敏度和线性范围,降低其背景值,提高信噪比呢?
优化检测结果的关键技术之一,酶标仪的核心部件单色器,主要作用是从波长范围宽广的光线中,分出波段较窄的单色光的装置。问世最早的是滤片型酶标仪,其配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以满足大部分实验的需要。但是随着实验类型变化和检测需求不断提高,有时需要对激发和发射光谱进行研究,滤光片型酶标仪由于其滤片的数目限制,不能达到要求,故随之诞生了光栅型的仪器。第一台光栅型酶标仪是由Molecular Devices推出的,其在激发光和发射光处各有一个光栅,但是考虑到光纯度不够,所以在激发光栅和发射光栅的后面又加入了一组带阻滤光片,对杂光进行二次过滤,其结果基本与纯粹的滤光片系统一致。Molecular Devices的这项专利技术受到保护后,其它很多酶标仪厂家在光栅型酶标仪上面只能采用双光栅系统来提高光纯度,降低杂光率,即激发和发射各用了一组光栅,整个光路系统共四个光栅,所以也称四光栅型酶标仪,虽然也能提高其对杂光过滤,但是由于多了一组光栅作用后,其光强度损失较大,检测的灵敏度也会受到影响。
优化检测结果的关键技术之二,光源选择,不同的单色器对光的透射率不同,会影响检测灵敏度,那么光源本身强度高低也会对实验结果产生很大的影响,目前酶标仪比较普遍使用的光源分别为普通氙闪灯、高能氙闪灯和卤素灯等。LED灯作为一种新光源以其自身许多优势慢慢被许多酶标仪所采用,我们知道在同等效率下,LED灯寿命是传统卤素灯的10倍,免去了频繁的更换灯泡和等待灯泡预热所带来的麻烦,其光源能量强、稳定性好,所以有助于提高荧光检测的灵敏度。
传统酶标仪是采用光路系统和检测器系统一体式设计模式,模块出厂就已经固定,不可以进行功能上的升级。市场上需要一种用户可根据自己的要求进行随意升级的多功能酶标仪,Molecular Devices针对市场需求推出了一款名为Paradigm多功能酶标仪。它将光源系统和检测系统独立分开,多套检测器固定在主机上,针对不同实验要求选用不同的卡盒,每一种卡盒其实就是独立的光路系统,例如光吸收实验在波长灵活性上要求较高,那么针对这样的要求,光吸收卡盒采用光栅作为其单色器。