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市场常规生化分析仪检测方法有哪些?
加入时间:2014-05-04 16:10:59  当前新闻点击率:1882

      在生化分析仪检测过程中,由于待测样品与试剂反应的性质不同,所使用的信号采集方法也有所不同。总的归纳起来有终点法、动态法和两点法这三种,为使大家对此有个清晰的了解,下面特对这三种方法进行一个详细的介绍:

      1、终点法:指经过一段时间的反应,反应达到平衡,反应液的吸光度不再变化,只与被测物的浓度有关。这类方法通常称为“终点”法。通过医疗设备实验证实,有色物质溶液的颜色深度与其浓度有关。溶液的浓度越大,则所显示的颜色越深。所以在比色分析中必须选择合适的显色条件和比色条件。显色条件的选择一般应严格按照试剂单的要求进行。比色条件的选择主要是选择合适的滤光片。即滤光片透光率最大的光波应当是溶液透光率最小的光波,也就是说滤光片的颜色与溶液的颜色互为补色,由于有色溶液对它的互补色具有最大的吸收。

      还有个别的生化项目,有干扰成分存在。为了消除实验的干扰,采用双波上进行丈量。此方法的关键是如何选择二个测定波长λ1和λ2。选择的原则是:使干扰组份在这两个波优点的吸光系数相等,而待测组份在这两个波优点吸光系数有明显的差别。
 
       2、动力学法:又称零级动力学法,指反应速度与底物浓度的零次方成正比,也就是与底物浓度无关。因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地天生某个产物,导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(ΔA/min)与被测物的活性或浓度成正比。动力学法也被称为连续监测法或速率法;主要用于酶活性的测定。酶是由生物体产生并能在体内外起催化作用的一类特殊蛋白质,体内几乎所有的代谢反应都是在不同的酶催化下进行的。酶的催化效率很高,而且非常不稳定。人体内酶浓度的变化能反映出很多疾病。同时酶的含量又很低,除免疫学方法外,不能直接测定其含量,只能测其催化反应过程中一定时间内物质变化的量,即酶促反应的速率,或称酶的活力。通过测定底物浓度的下降或产物浓度的上升,可以追踪酶促的反应过程中底物转化为产物的过程。酶促反应过程可分为几个时期。化学反应的初始阶段,底物和产物的变化不明显,此期在几秒到几分钟,称为延迟期;随后是底物和产物变化与时间成直线的时期,形成产物的速率恒定,称为零级反应期;接着是反应速率持续下降,进进一级反应期。

      3、固定时间法:又称为一级动力学法、二点动力学法等,属于带标准的速率法,是动态法的另一种形式。指在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必须经过一段延迟时间才能进进稳定反应期。


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