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生化分析仪试剂空白监测参数如何设置?
加入时间:2014-05-14 15:40:50  当前新闻点击率:3124

    生化分析仪在检测前,无样品或以水代替样品在反应过程中观察试剂空白值或其变化情况,主要用于监测试剂质量及医疗设备的稳定性,利用试剂空白对试剂本身或反应漂移引起的误差进行补偿,用以校正△A或△A/min。它与测定波长、光径大小、不同试剂及配方和样品试剂比例等有关,不能盲目套用,必要时宜实际测定。

    1.试剂吸光度上限和下限定点监测试剂的吸光度。它常用规定波长及光径下的吸光度值表示。仪器的试剂空白检测点因仪器和测定方法的不同而有差异。终点法常在PO点读数,连续监测法常以反应监测起始点来判读。仪器在试剂空白检测及相关的校准测定时,若监测到超过此参数的限值,则提示试剂失效或校准无效。反应吸光度向上的试验取上限值:如Trinder反应以酚或2-羟-3,5-二氯苯磺酸等和4-氨基安替比林作用,生成红色色素,试剂有一定的自发氧化,其试剂一般要求试剂吸光度上限≤0. 1-0. 4。以结合型硝基苯衍生物作为底物的ALP和GGT常要求≤0.6~0.8。反应吸光度向下的试验取下限值:如以NADH或NADPH为辅酶的ALT和Urea(紫外法)等试验,一般要求试剂吸光度下限≥1.0。

    2.试剂空白速率顾名思义,它是在反应过程中对试剂空白的变化速率作连续监测,其数值在样品测定结果中自动扣除。试剂中可能混有的其他杂酶或干扰物对试剂空白速率有影响。在酶促反应中,试剂空白速率也是试剂在监测过程中底物自发降解的结果。底物为还原型辅酶者,本身不稳定而分解,多呈下降趋势;以硝基苯酚或苯胺的衍生物作底物,在碱性环境中自发水解成被测物质,多呈上升趋势。此参数主要用于连续监测法。一般认为酶活性测定的试剂空白速率(△A/min)应≤0. 001~0.003。由于试剂空白速率与仪器检测下限、正常参考范围下限等指标有关,有时也以浓度单位表示。要根据K值、仪器稳定性、方法允许变异而定。例如,ALT或AST40U/L以下活力浓度的分析误差应≤10%,其试剂空白速率应≤4.0U/L。一些仪器的程序参数中没有此参数,但我们应在试剂空白的测定资料中关注它,若资料波动大,须查找试剂或仪器原因。

    3.试剂空白的日常监测测定方法设置了试剂空白的项目,都要先行作试剂空白测定,在样品测定计算中自动扣除。由于试剂空白不是在每一个样品测定中实时测定并扣除,当样品测定中试剂的变化在未达到参数设置限值时不易发现,试剂空白扣除会产生误差。所以,应根据试剂的稳定性确定试剂空白及相关的校准的测定频率。连续监测法的试剂应每天(尤其在换另瓶或另批号试剂时)常规测定此参数。对样品的异常结果.也应及时对其测定吸光度资料(包括与试剂空白有关的资料,例如PO点读数)观察分析。

    4.有的半自动生化仪没有试剂吸光度上限和下限设定,但一般在测定屏幕都显示初始吸光度值,应人工加以判断。酶活力测定结果呈负值,有时可能与试剂空白错误有关。

    5.试剂吸光度上限和下限不是试剂质量的唯一指针。因此,一定的校准频率和室内质控是质量保证的必需手段。我们在实际工作中就遇到酶活力测定的试剂空白数据在规定限值内,但质控物测定结果连续偏低,病人结果因每天标本少而难以判断,最后发现是试剂质量下降。


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